Trombocitno-leukocitni međusloj

Trombocitno-leukocitni međusloj (engl. buffy coat) dio je antikoaguliranog uzorka krvi koji nakon centrifugiranja pune krvi sadrži većinu leukocita i trombocita.^[1]

Antikoagulirana se krv prilikom centrifugiranja razdvaja na sloj bistre žućkaste tekućine (krvna plazma), bjelkasti međusloj trombocita i leukocita te donji crveni sloj eritrocita.

Kvantitativni dijagram krvnih komponenti nakon centrifugiranja pune krvi

Trombocitno-leukocitni međusloj čini <1 % ukupnog volumena krvi.^[2]^[3] Obično je bijele boje, ali u stanju neutrofilije može imati i zelenkastu nijansu jer neutrofili sadrže zeleni protein mijeloperoksidazu.

Međusloj se obično rabi za ekstrahiranje DNA^[4] jer su leukociti koncentriran izvor staničnih jezgri.^[5] Metoda se upotrebljava pri obradi krvi sisavaca jer njihovi eritrociti nemaju staničnu jezgru. Međusloj se smrznut može pohraniti na dugi niz godina.^[6]

U medicinskoj dijagnostici

Kvantitativni trombocitno-leukocitni sloj jest test koji se temelji na centrifugiranju krvnih sastojaka i služi otkrivanju krvnih parazita.^[7]

U testu se puna krv upije u kapilarnu cjevčicu premazanu akridinoranžom (fluorescentnim bojilom) i centrifugira se. Ukoliko u krvi ima parazita, oboje se i koncentriraju u sloju između eritrocita i trombocitno-leukocitnog međusloja te se vide kao fluorescentni sloj kada se kapilarna cjevčica izloži ultraljubičastom zračenju.

Kod leukopenije uobičajena analiza izgleda leukocita može biti teška ili nemoguća. U takvim se slučajevima razmaz krvi radi iz ekstrahiranoga trombocitno-leukocitnog međusloja.

Izvori

↑ Cottler-Fox, Michele; Montgomery, Matthew; Theus, John. 1. siječnja 2009. Treleaven, Jennifer; Barrett, A John (ur.). CHAPTER 24 - Collection and processing of marrow and blood hematopoietic stem cells. Hematopoietic Stem Cell Transplantation in Clinical Practice (engleski). Churchill Livingstone. Edinburgh. str. 249–256. ISBN 978-0-443-10147-2. Pristupljeno 9. kolovoza 2022.
↑ Mescher, Anthony L. 2018. Blood. Junqueira's Basic Histology: Text and Atlas (engleski). 15 izdanje. McGraw-Hill Education. str. 237. ISBN 9781260026184
↑ Marieb, Elaine N. 2007. Human Anatomy & Physiology. Seventh izdanje. Pearson Benjamin Cummings. San Francisco. ISBN 978-0-8053-5910-7
↑ Mychaleckyj, Josyf C; Farber, Emily A; Chmielewski, Jessica; Artale, Jamie; Light, Laney S; Bowden, Donald W; Hou, Xuanlin; Marcovina, Santica M. 10. lipnja 2011. Buffy coat specimens remain viable as a DNA source for highly multiplexed genome-wide genetic tests after long term storage. Journal of Translational Medicine. 9: 91. doi:10.1186/1479-5876-9-91. ISSN 1479-5876. PMC 3128059. PMID 21663644
↑ Fabre, Anne-Lise; Luis, Aurélie; Colotte, Marthe; Tuffet, Sophie; Bonnet, Jacques. 30. studenoga 2017. High DNA stability in white blood cells and buffy coat lysates stored at ambient temperature under anoxic and anhydrous atmosphere. PLOS ONE. 12 (11): e0188547. Bibcode:2017PLoSO..1288547F. doi:10.1371/journal.pone.0188547. PMC 5708797. PMID 29190767
↑ Gustafson, Sarah; Proper, Jacqueline A.; Bowie, E. J. Walter; Sommer, Steve S. 1. rujna 1987. Parameters affecting the yield of DNA from human blood. Analytical Biochemistry (engleski). 165 (2): 294–299. doi:10.1016/0003-2697(87)90272-7. ISSN 0003-2697. PMID 3425899
↑ Ahmed, Nishat Hussain; Samantaray, Jyotish Chandra. 2014. Quantitative Buffy Coat Analysis-An Effective Tool for Diagnosing Blood Parasites. Journal of Clinical and Diagnostic Research. 8 (4): DH01. doi:10.7860/JCDR/2014/7559.4258. ISSN 2249-782X. PMC 4064892. PMID 24959448

[1] Cottler-Fox, Michele; Montgomery, Matthew; Theus, John. 1. siječnja 2009. Treleaven, Jennifer; Barrett, A John (ur.). CHAPTER 24 - Collection and processing of marrow and blood hematopoietic stem cells. Hematopoietic Stem Cell Transplantation in Clinical Practice (engleski). Churchill Livingstone. Edinburgh. str. 249–256. ISBN 978-0-443-10147-2. Pristupljeno 9. kolovoza 2022.

[2] Mescher, Anthony L. 2018. Blood. Junqueira's Basic Histology: Text and Atlas (engleski). 15 izdanje. McGraw-Hill Education. str. 237. ISBN 9781260026184

[3] Marieb, Elaine N. 2007. Human Anatomy & Physiology. Seventh izdanje. Pearson Benjamin Cummings. San Francisco. ISBN 978-0-8053-5910-7

[4] Mychaleckyj, Josyf C; Farber, Emily A; Chmielewski, Jessica; Artale, Jamie; Light, Laney S; Bowden, Donald W; Hou, Xuanlin; Marcovina, Santica M. 10. lipnja 2011. Buffy coat specimens remain viable as a DNA source for highly multiplexed genome-wide genetic tests after long term storage. Journal of Translational Medicine. 9: 91. doi:10.1186/1479-5876-9-91. ISSN 1479-5876. PMC 3128059. PMID 21663644

[5] Fabre, Anne-Lise; Luis, Aurélie; Colotte, Marthe; Tuffet, Sophie; Bonnet, Jacques. 30. studenoga 2017. High DNA stability in white blood cells and buffy coat lysates stored at ambient temperature under anoxic and anhydrous atmosphere. PLOS ONE. 12 (11): e0188547. Bibcode:2017PLoSO..1288547F. doi:10.1371/journal.pone.0188547. PMC 5708797. PMID 29190767

[6] Gustafson, Sarah; Proper, Jacqueline A.; Bowie, E. J. Walter; Sommer, Steve S. 1. rujna 1987. Parameters affecting the yield of DNA from human blood. Analytical Biochemistry (engleski). 165 (2): 294–299. doi:10.1016/0003-2697(87)90272-7. ISSN 0003-2697. PMID 3425899

[ahmed-7] Ahmed, Nishat Hussain; Samantaray, Jyotish Chandra. 2014. Quantitative Buffy Coat Analysis-An Effective Tool for Diagnosing Blood Parasites. Journal of Clinical and Diagnostic Research. 8 (4): DH01. doi:10.7860/JCDR/2014/7559.4258. ISSN 2249-782X. PMC 4064892. PMID 24959448

[1]

[2]

[3]

[4]

[5]

[6]

[7]